_{*.*       ***，***，***，***-伏马毒素**(***-***)，***-伏马毒素**(***-***)}

和***-伏马毒素**(***-***)毒素固体或液体标准品，纯度≥**.**%，均购自

*****或*****-*******。

*.*标准溶液的配制

分别精确称取***，***和***标准品*.*****，用乙腈溶解定容至****，混匀。此溶液中各种伏马毒素的浓度均为*.*******-*。存储于棕色玻璃瓶中，

-**?*下避光保存。

*.**混合标准工作液

用移液器分别吸取***，***和***标准储备液***在****棕色容量瓶中，用**/**的乙腈/*.*%甲酸溶液定容至****，制备成**μ***-*的*种标准品的混合标准使用液。在*℃冰箱中保存，可稳定*个月。

*.**内标标准工作液

用***μ*刻度注射器分别吸取(***-***,***-***,***-***)***μ*(浓度**μ*/**)，用**/**的乙腈/*.*%甲酸水溶液稀释配置成*******-*的工作液。在*℃冰箱中保存，可使用*个月。

*设备和耗材

*.*串联液质联用仪

*.*固体粉碎机

*.*涡旋器

*.*配有****离心管的高速离心机

*.*超声波振荡器

*.*氮气吹干装置

*.*固相萃取柱:**************净化柱

*操作步骤

*.*样品制备处理

*.*.*固体样品:取样品***，经固体粉碎机粉碎成粉末状，混匀过筛，备用。称取样品粉末**，准确称量后置于****的离心管中，分别加入*种混合同位素内标工作液***μ*,加入****乙腈—水(**+**)溶液，浸泡*****，超声波震荡*****，*****转/分离心*****，收集上清液***,用*.****/*的****溶液调节***-*，然后加入****甲醇-水(**+**)溶液。**************

_{净化柱先用甲醇***平衡柱子，再用****:*甲醇-水混匀后过柱。****混合}

液上样，流速为*-*滴/*，用****甲醇-水(**+**)溶液以*-*滴/*的流速淋洗，再加入****含*%的甲酸的甲醇溶液洗脱，抽干后洗脱液在**-**℃下氮气吹干，用**/**的乙腈/*.*%的甲酸水溶液定容至***，涡旋***,用*.**μ*微孔滤膜过滤于进样瓶中。

*.*.*油类样品:称取样品**，准确称量后置于****的离心管中，分别加入

*种混合同位素内标工作液***μ*,加入****乙腈—水(**+**)溶液，涡旋振荡****，静止**分钟或******/***,离心****，待溶液分层，取下层液***,用*.****/*的****溶液调节***-*，然后加入****甲醇-水(**+**)溶液。**************净化柱先用甲醇***平衡柱子，再用****:*甲醇-水混匀后过柱。****混合液上样，流速为*-*滴/*，用****甲醇-水(**+**)溶液

以*-*滴/*的流速淋洗，再加入****含*%的甲酸的甲醇溶液洗脱，抽干后洗脱液在**-**℃下氮气吹干，用**/**的乙腈/*.*%的甲酸水溶液定容至***，涡旋***,用*.**μ*微孔滤膜过滤于进样瓶中。

*.*样品分析

*.*.*液相色谱参考条件

色谱柱:****************柱，*****×*.***，粒径*.*μ*或相当者柱温:**℃

样品温度:*℃进样体积:*μ*

液相色谱流动相:*:*.*%甲酸*:乙腈/甲醇(**/**，*/*)

线性梯度洗脱条件:*-*.****,*%**%-**%*.*-*.****,*%

**%-***%*.*-*.****,*%保持***%,*.*-*.****,*%***%-**%，平衡

*.****，总用时****流速:*.****·***-*。

*.*.*质谱参考条件毛细管电压:*.***

电离模式:***+源温度:***℃脱溶剂气温度:***℃

碰撞梯度:*.*

_{脱溶剂气流量:****/**}

反吹气流量:***/**

电子倍增电压:****

碰撞室压力:*.*×**-*****

各种真菌毒素的质谱条件参数见表*

表*   目标化合物的主要参考质谱参数

_{*.*标准曲线的制备及样品测定}

*.*.*标准曲线制备

用移液器分别吸取混标溶液适量，配成*，*，**，**，**，***，***，***，

****μ***-*的标准系列溶液，每份溶液含*****-*的同位素内标，经

****-**/**分析，采用同位素稀释法建立标准曲线。

*.*.*样品测定

试样液经****-**/**分析，测得其峰面积，采用同位素稀释法通过上述标准曲线计算其浓度。

在测定过程中，建议每测定**～**个样品用同*份标准溶液或标准物质检查仪器的稳定性。

*.*谱图

_{图*标准谱图}

*   结果计算

_{图*样品谱图}

_{试样中真菌毒素含量按式(*)进行计算。}

式中:

_*=^**´*´****

^*´****

………………………………(*)

_{*—试样中真菌毒素的含量，单位为微克每千克(μ*/**)}

**—测定样品溶液中真菌毒素的浓度，单位为纳克每毫升(**/**)*—试样消化液总体积，单位为毫升(**)*—试样质量，单位为克(*)。

按照数值修约规则保留结果的有效数字。

测定结果的表述:报告平行样测定值的算术平均值。

*精密度在重现性条件下对参照物或添加材料进行重复分析的实验室之间的变异系数(**),不应超过用*******公式计算得到的水平。公式如下:

^{**=*(*-*.*****)}………………………………(*)

_{此处*是表示为**的幂数的质量范围(即***/*=**-*)。}

表*在分析物质量范围内定量方法的重复性**参考值

_质量范围

(μ*/**)

重复性

(%)

≤*              *～**         **～***       ***-****      ≥****

(*)                (*)                  (*)                    **                **

_{(*)对于低于***μ*/**的质量范围，用*******公式计算会得出不可接受的高}

值。因此，对于低于***μ*/**的浓度其***应尽可能地低。

对于在重复性条件下进行的分析，实验室内**应特别地位于上述数值的*

/*～*/*之间。对于在实验室内重现性条件下进行的分析，实验室内的**不应大于重现性**。

对于有规定的允许限度的物质，方法应达到实验室内的重现性不大于在*.*

倍允许限度的浓度时相应得到的重现性**。

_{食品中双酚*和壬基酚的检测高效液相色谱-串联质谱法}

* 适用范围

本规程适用于婴幼儿食品及食用植物油等食品中双酚*、壬基酚含量的液相色谱-串联质谱法测定。

当婴幼儿食品样品取*.**时，本程序的检出限(***):双酚*为*.*μ*/**，壬基酚为*.*μ*/**。

当食用植物油样品取*.**时，本程序的检出限(***):双酚*为*.*μ*/**，壬基酚为*.*μ*/**。

*    原理样品经过凝胶渗透色谱法(***)除脂净化(婴幼儿食品需乙酸乙酯:环己烷(*:*，*/*)超声提取)，同位素稀释高效液相色谱-串联质谱技术(****-**/**)检测，与标准系列比较定量。

* 试剂

除特殊注明外，本标准所使用的试剂均为色谱纯，水为**/*****规定的*级水。

*.* 甲醇。

*.* 乙腈。

*.* 乙酸乙酯。

*.* 环己烷。

*.* 丙酮。

*.* 正己烷。

*.* 氨水(**-****%)。

*.* 同位素内标:***-**，*-*-**-**，食用植物油样品检测需*&***;*;植物油。

*.* 标准储备液:分别准确称取**.***的标准品及内标于****容量瓶中,用甲醇(*.*)溶解并定容制成*.***/**标准储备液，-**º*以下保存，标准储备液在**个月内稳定。

*.**混合内标工作液:用甲醇(*.*)将各内标标准储备液配置成浓度为***µ*/*

的混合内标工作液。

_{*.**混合标准使用液:根据需要，用甲醇(*.*)稀释各标准储备液(*.*)配}

制为适当浓度(浓度分别为*.**μ*/*、*.**μ*/*、*.**μ*/*、**.**μ*/*、**.**μ*/*、**.**μ*/*、***.**μ*/*)，标准工作溶液中各含内标浓度为**μ*/*。

* 仪器与耗材

*.* 液相色谱-串联*级杆质谱仪:配有电喷雾离子源。

*.* 电子天平:感量为*.*****和*.***。

*.* *****-*超纯水机。

*.*凝胶渗透色谱仪。

*.* 涡旋混合器。

* 操作步骤

*.*样品前处理

*.*.*婴幼儿食品

直接称取奶粉样品*.**于*******上样样品管中，加入****乙酸乙酯:

环己烷(*:*，*/*)，涡旋均匀，超声提取*****,于*°*、*****/***离心

*****，取***上清液用于***净化。***采用苯乙烯树脂*********-*(***

×****)凝胶色谱柱，流动相为乙酸乙酯:环己烷(*:*，*/*)，流速*.***/***。收集**-*****组分于*****茄形瓶中，**℃、****/***旋转蒸发至干，***甲醇定容，同时做试剂空白试验。

*.*.*食用植物油

称取食用植物油样品*.**于***上样样品管中，加入***乙酸乙酯:环己烷(*:*，*/*)，*******涡旋混合****，用于***净化。***分离采用苯乙烯树脂*********-*(***×****)凝胶色谱柱，流动相为乙酸乙酯:环己烷(*:*，*/*)，流速*.***/***。收集**-*****组分于*****茄形瓶中，**º*，******旋转蒸发至干，***甲醇(*.*)定容，同时做试剂空白试验。

*.*测定

*.*.*色谱柱:*************************柱(****×*.***)捕集柱:********************(*/*:*********)，捕集柱位于进样阀之前(图

_{*)。根据仪器性能调至最佳状态，液相仪器参考条件见表*。}

*.*.*质谱条件:离子源，电喷雾电离***(-)毛细管电压，*.***离子源温度，***º*脱溶剂温度，***º*脱溶剂气流量，****/*锥孔气流量为**

*/*。采用多反应监测(*****-**************************，***)模式采集数据。具体的离子采集参数见表*。

*.*.*标准使用液经甲醇(*.*)分别稀释浓度为*.**μ*/*、*.**μ*/*、*.**μ*/*、**.**μ*/*、**.**μ*/*、**.**μ*/*、***.**μ*/*。将标准系列溶液，样品和试剂空白上机进样，以目标组分峰面积与相应内标峰面积的比值*对相应浓度*(μ*/*)进行线性回归。

* 计算

_{试样测定结果按公式    (*)计算目标物残留量(µ*/**):}

式中:

_*=^***´*

^**

…………………………(*)

_{**——试样中检测目标化合物残留量，单位为微克每千克(µ*/**)}

^***^{——由回归曲线计算得到的上机试样溶液中目标化合物含量，单位为微}克每升(µ*/*)

*——浓缩至干后试样的定容体积，单位为毫升(**)

*——试样的质量，单位为克(*)。

*    测定低限和回收率按能够准确确认的目标化合物浓度来估计各目标化合物在婴儿配方奶粉基质中的检出限，样品基质、取样量、进样量、色谱分离情况、电噪声水平以及仪器灵敏度均可能对样品检出限造成影响，因此噪声水平应从实际样品谱图中获取。当某化合物的结果报告未检出时，应同时提供样品的检出限。

如是婴幼儿食品，采用上述方法，*种目标化合物在婴儿配方食品中的测定低限为*.*μ*/**。婴儿配方食品样品的加标回收率为**.*%-***.*%，相对标准偏差为*.*%-**.*%。(参见表*)。本操作规程的精密度是指在重复条件下获得的独立测定结果的相对相差，婴儿配方食品中不同含量双酚*和壬基酚的相对相差参考值见表*。

如是食用植物油，采用上述方法，*种目标化合物在食用植物油中的测定低

_{限为*.*μ*/**。食用植物油样品的加标回收率为**.*%-***.*%，相对标准偏差}

为*.*%-**.*%。(参见表*)。本操作规程的精密度是指在重复条件下获得的独立测定结果的相对相差，食用植物油中不同含量双酚*和壬基酚的相对相差参考值见表*。

图*色谱柱连接示意图

表*    两种目标化合物的参考液相色谱条件

_{表*两种目标化合物和*种内标化合物的质谱采集参数}

_{*注:定量离子}

表*婴儿配方奶粉中*种目标化合物不同加标水平的相对回收率及相对标准偏差

_{表*        食用植物油中*种目标化合物不同加标水平的相对回收率及相对标准偏差}

_{淀粉类食品中顺丁烯*酸和顺丁烯*酸酐总量的测定}

*   范围

本方法规定了淀粉类食品中顺丁烯*酸(**********)与顺丁烯*酸酐

(***************)总量测定的高效液相色谱法。

本方法适用于淀粉类食品中顺丁烯*酸和顺丁烯*酸酐总量的测定。

本方法定量限为***/**。

*   原理

试样以**%甲醇溶液萃取，*.**氢氧化钾皂化(必要时)后，以高效液相色^谱的***^{分离，紫外检测器检测，以保留时间定性，外标法定量。}

*   试剂与材料

*.*      甲醇，色谱级。

*.*      磷酸(**%)，分析纯。

*.*      盐酸，分析纯。

*.*      氢氧化钾，分析纯。

*.*      去离子水(电阻率为**°*可达***?.**以上)。

*.*      顺丁烯*酸对照用标准品，纯度≥**.*%。

*.*      **%甲醇溶液:量取甲醇*****，加去离子水至*****，混匀。

*.*      **盐酸溶液:量取去离子水****，缓慢加入盐酸****，混匀，冷却后，加去离子水至*****。

*.*      *.**氢氧化钾溶液:称取氢氧化钾***，加去离子水溶解，并稀释至*****。

*.**   *.*%磷酸溶液:量取磷酸*.***，加去离子水至******。

*.**   流动相溶液的配制:量取*.*%磷酸溶液与甲醇以**:*(*/*)比例混匀，经滤膜过滤后备用。

*.**   标准溶液的配制:称取顺丁烯*酸对照用标准品约*****(精确至*.***)，以去离子水溶解并定容至*****，作为标准储备溶液，冷藏保存。临用时，以去离子水稀释至*.***/**～*.***/**系列溶液，作为标准溶液。

_{*仪器与设备}

*.*    高效液相色谱仪，配*极管阵?检出器

*.*    色谱柱:***********，***，内径*.***×****，或等效色谱柱

*.*    振荡器

*.*    冷冻离心机

*.*    容?瓶:****及*****

*.*    离心管:****，**材质

*.*    滤膜:孔径*.**μ*，****材质

*   分析步骤

*.*    试样溶液制备

*.*.*淀粉类试样

称取均质或混匀后试样约*.****，置于离心管中，加**%甲醇溶液****，振荡**分钟后，以去离子水稀释至****。混匀后*℃冷冻离心，取上清液经滤膜过滤，作为分析用试样溶液。

*.*.*含淀粉类制品或淀粉类食品

称取均质或混匀后试样约*.****，置于离心管中，加**%甲醇溶液****，振荡**分钟后，加*.**氢氧化钾溶液***，混匀，静置*小时。加**盐酸溶液约*.***，使呈酸性，以去离子水稀释至****。混匀后*℃冷冻离心，取上清液经滤膜过滤，作为分析用试样溶液。

*.*.*空白溶液

除不含试样外，依照*.*.*或*.*.*操作。

*.*测定

*.*.*色谱条件:

*.*.*.*色谱柱:***********，，***，内径*.***×*****.*.*.*流动相:*.*%磷酸溶液与甲醇(**:*，*/*)

*.*.*.*检测波长:*****

*.*.*.*     ?速:***/***

*.*.*.*     进样体积:**μ*。注:*.所用色谱柱应有效将顺丁烯*酸与反丁烯*酸(***********)、醋酸、苹果酸(*********)及琥珀酸(************)等分离。

_{*.当上述色谱条件?适用时，可根据所用的仪器进行适当调整，设定合适的}

测定条件。

*.*.*测定:精确吸取空白溶液、标准溶液及试样溶液，分别注入高效液相色谱仪中进行测定。以试样溶液和标准溶液色谱图上的色谱峰保留时间定性，以色谱峰的峰面积进行定量。

*   结果计算按下式计算试样中顺丁烯*酸与顺丁烯*酸酐总量(以顺丁烯*酸计):

_*=*´*´*****´****

式中:

*—试样中顺丁烯*酸与顺丁烯*酸酐的总?，单位为毫克每千克(**/**)*—由标准曲线获得的顺丁烯*酸浓?，单位为微克每毫升(**/**)

*—试样定容体积，单位为毫升(**)

*—取样?，单位为克    (*)。

注:当食品中有影响检测结果的物质时，应探讨和分析其干扰的来源。

*   精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的**%。

*   色谱图

附图   *.***/**顺丁烯*酸标准色谱图

_{原料乳及液态乳中舒巴坦的测定}

* 范围本方法规定了原料乳及液态乳中舒巴坦的液质法。本方法适用于原料乳及液态乳中舒巴坦的测定。

* 规范性引用文件下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日

期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。

* 原理

原料乳或液态乳用酸性水溶液超声提取，高速离心，上清液经***固相萃取小柱净化，用液相色谱-串联质谱法测定和确证，外标法定量。

* 试剂与材料

除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为**/*****规定的*级水，液相色谱流动相用水为**/*****规定的*级水。

甲醇:色谱纯。

乙腈:色谱纯。

乙酸。

乙酸溶液:*.*%。舒巴坦标准储备液:

称取舒巴坦标准品**.****(精确至*.*****)，用水溶解并定容至*****，标准储备液浓度为*.***/**，贮存于*℃冰箱中。

舒巴坦标准工作液。吸取舒巴坦标准储备液*.****于*****的容量瓶中，用水定容至刻度，配的浓度为*.***/**的标准工作溶液，贮存于*℃冰箱中。

********固相萃取小柱，*****/***,或相当者。

*      仪器与设备常用实验室仪器及下列仪器设备:

天平:感量为*.***。

旋涡混合器。

_离心机。

氮吹仪。

液相色谱串联质谱仪:配有电喷雾离子源(***)。

* 分析步骤试样制备样液提取:

称取试样**(精确至*.***)，加入*****.*%乙酸水溶液(*.*)，涡旋***，超声提取*****，用*.*%乙酸水溶液(*.*)定容至****，涡旋混匀后，*******离心*****，取上清液待净化。

净化样品

柱子预处理:***固相萃取小柱，用***甲醇、****.*%乙酸水溶液进行活化，

样品净化:取****离心上清液自然流过小柱，用****.*%乙酸水溶液淋洗小柱，用吸球吹出小柱中残留液体，加***甲醇洗脱，收集洗脱液，缓慢氮气流下吹干，准确吸取***水溶解，经*.**μ*滤膜过滤作为测定液，用液相色谱

-串联质谱测定。测定

液相色谱分离条件

*)色谱柱:***   **色谱柱，*.***×*****，*.*μ**)流动相:*:*.**%乙酸-水                      *:乙腈

*)柱温:**℃     样品温度:**℃

*)进样量:*µ*

*)梯度洗脱

_{质谱参考条件}

_{*)源温度:***℃}

*)毛细管电压:*.****)锥孔压力:**.**

*)脱溶剂气温度:***℃     脱溶剂气流速:****/***)碰撞气流速:*.****/***                            碰撞能量:*.*

*)入口电压:*.*         出口电压:*.**)低端分辨率:*.*，高端分辨率**.*

*)弱洗溶液:乙腈/水     **/**       弱洗体积:*****

强洗溶液:乙腈/水    **/**       强洗体积:******)质谱参数见表*

表*.舒巴坦的质谱参数

_{标准工作曲线的制备}

取空白样品按照*.*步骤制备空白基质溶液，将标准工作溶液(*.*)用空白基质溶液逐级稀释得到所需浓度系列的标准溶液，按浓度从低到高依次经液相色谱-串联质谱测定，以定量离子的峰面积为纵坐标，以标准溶液的浓度为横坐标，得标准工作曲线。舒巴坦的**-**/**多反应监测质量色谱图参见附录中的图*。

定性测定在相同试验条件下，试样中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时

间偏差在±*.*%之内且试样中定性、定量离子的相对丰度比与浓度接近的标准溶液中对应的定性、定量离子的相对丰度比进行比较，若偏差不超过表*规定的范围，可判定为试样中含有对应的待测物。

表*.定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对丰度(%)  允许偏差(%)

_定量测定

本方法采用外标标准曲线法定量。以不同浓度的标准溶液浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标，作标准曲线线性回归方程，以试样的峰面积与标准曲线比较定量。待测物的响应值均应在线性范围内。

* 分析结果的表述结果计算:试样中舒巴坦的含量由色谱数据处理软件或按式(*)计算获得:

_*=^*´*´*_{………………………………(*)}

*

式中:

*— 试样中舒巴坦的含量，单位为微克每千克，μ*/**

*— 试样中舒巴坦峰面积对应的浓度，单位为纳克每毫升(**/**)

*—试样定容体积，单位为毫升(**)

*— 试样的量，单位为克(*)*— 稀释倍数。

计算结果保留*位有效数字。

* 空白实验

除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。

* 平行试验

按以上步骤，对同*样品进行平行试验测定。

** 方法检测限

原料乳和液态乳中舒巴坦的检测限为*.*μ*/**，定量限为*.*μ*/**。

** 允许差在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的**%。

_{焦糖色素中副产物*-甲基咪唑(*-***************,*-***)}

和*-乙酰基-*-羟基-丁基咪唑

(*-******-*-************-**************，***)的液相色谱-质谱/质谱法(**-**/**)测定

_*范围

本标准适用于焦糖色素中副产物*-***和***的测定。

* 原理

*-***和***是极性较强的碱性杂环化合物，易溶于水和乙醇。焦糖色素溶于水后，经混合型强阳离子固相萃取柱净化，浓缩后经**********-*色谱柱分离后，液相色谱-质谱/质谱法(**-**/**)测定，内标法定量。

* 试剂和材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为**/*****规定的*级水。

^*.*甲醇(***^{**):色谱纯。}

^*.*乙腈(***^{**):色谱纯。}

*.* 盐酸:优级纯，含量**-**%。

*.* 氨水:优级纯，含量**-**%。

*.*    **************固相萃取柱(***/****)混合型阳离子交换固相萃取柱，基质为聚苯乙烯-*乙烯基苯高聚物，****、

***，或相当者。使用前依次用***甲醇、***水活化。

*.* 标准品

^{*.*.* *-***(*}*^**^**^{):***编号***-**-*，纯度≥**.*%。}

^*.*.****(**^***^**^**^{):***编号*****-**-*，纯度≥**.*%。}

^*.*.***^{-*-***:***编号...，纯度≥**.*%。(请按照实际使用内标物质作调}整)

*.*盐酸溶液(*.*****/*):量取**.***盐酸(*.*)，加水定容至*****得盐酸溶液(****/*)吸取盐酸溶液(****/*)***，加水定容至*****得盐酸溶液(*.*****/*)。

*.*洗脱液:氨水+甲醇=*+**(*/*)。

_{*.*氨水(*.**%)乙腈(*%)溶液:*****容量瓶中加入***乙腈，加入氨水**}

µ*(*.*)，加水定容至刻度。

*.**氨水溶液(*.**%):吸取***µ*氨水(*.*)于**容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，?匀后备用。

*.**水系微孔滤膜:*.**µ*。

*.** 标准溶液的制备

*.**.* 标准贮备液(*.***/**)

*.**.*.*标准贮备液:分别精确称取*-***和***标准品*.*****(精确至*.*****)，用水分别溶解定容至****，其中*-***和***浓度分别为*.***/**。贮备液置于*℃冰箱中保存。

^{*.**.*.*内标贮备液:精确称取*}*^{-*-***标准品*.*****(精确至*.*****)，}用水定容至****，混匀，浓度为*.***/**。贮备液置于*℃冰箱中保存。

*.**.* 标准中间液(**.*µ*/**):

*.**.*.*混合标准中间液:分别吸取*.****-***和***标准贮备液(*.**.*.*)于****容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，其浓度为**.*µ*/**。

*.**.*.*内标中间液:吸取*.***内标贮备液(*.**.*.*)于****容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，其浓度为**.*µ*/**。

*.**.* 标准使用液

*.**.*.*混合标准使用液:分别准确吸取*.***和*.***混合标准中间液

(*.**.*.*)于****容量瓶中，分别用水定容至?度，混匀，配制成浓度为*.*

µ*/**和*.*µ*/**的混合标准使用液。

*.**.*.*内标使用液:吸取*.***内标中间液(*.**.*.*)于****容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，其浓度为*.*µ*/**。

*.**.*标准工作液:分别吸取*定体积的标准使用液(*.*µ*/**和*.*µ*/**)

(*.**.*.*)于*.***进样瓶中，分别加入*.***内标使用液(*.*µ*/**)

(*.**.*.*)，加溶液(*.*)补足到*.***。配制成*-***和***的浓度分别为****/**、****/**、*****/**、*****/**、*****/**和******/**。

*.**氩气:纯度大于**.****%。

*.**液氮:纯度大于**.****%。

*仪器和设备

_{*.*液相色谱-质谱/质谱(**-**/**)仪:配有电喷雾离子源(***)。}

*.*电子天平:感量分别为*.***、***。

*.*涡旋快速混合器。

*.*吹氮仪。

*.*全自动固相萃取仪(或普通固相萃取仪)。

*.*纯水仪。

*分析步骤

*.*试样制备

称取焦糖色素样品**(准确至*.****)，置于*****容量瓶中，加水定容至刻度。取*.***上述样品溶液，加入*.***水，加入*.***盐酸溶液(*.*****/*)

(*.*)，加入*.***内标使用液(*.*µ*/**)(*.**.*.*)，混匀后待固相萃取净化。

*.*固相萃取

将*.*制备好的样品溶液加入*.*中刚活化好的小柱中，控制流速小于*.***/***，抽干，加入***水和***甲醇淋洗，控制流速小于*.***/***，抽干，用洗脱液(*.*)***洗脱收集，控制流速小于*.***/***，抽干。将收集液在低于**℃条件下，氮气吹干，残渣用*.***溶液(*.*)定容，涡旋混合

****，过*.**µ*水系微孔滤膜，滤液供**-**/**测定。

*   仪器参考条件

*.*液相色谱条件

*.*.*    色谱柱:**********-*柱(*.***×*****,*µ*)，或相当者。

*.*.*    流动相:*为*.**%氨水溶液*为乙腈。梯度洗脱条件见表*

*.*.*    柱温:**℃

*.*.*    进样量:**μ*

*.*.*    流速:*.***/***

_{表*液相梯度洗脱条件}

_{*.*质谱检测器条件:}

*.*.*电离方式:*-***电离，正离子

*.*.*离子喷雾电压:正离子*****

*.*.*挥发气温度:***℃

*.*.*毛细管温度:***℃

*.*.*鞘气:*****

*.*.*辅助气:*****

*.*.*碰撞气:氩气

*.*.*扫描模式:多反应监测(***)，各离子参数详见表*

表*   多反应监测(***)

_{*标准曲线的制作}

取标准系列工作液(*.**.*)分别进样**.*µ*，浓度由低到高进样检测，

_{以定量子离子峰面积浓度作图，得到标准曲线回归方程。}

^{在上述仪器条件下测定峰面积，*}*^{-*-***为内标，然后分别作*-***(***)}与内标的峰面积比—*-***(***)浓度(**/**)标准曲线，曲线方程见式(*):

_{*=**+*…………………………………………    (*)}

^{式中: *——*-***或***峰面积与内标物质*}*^{-*-***峰面积的比值}

*——*-***或***的浓度，单位为钠克每毫升(**/**)。

*试样溶液的测定

取制备的试样溶液和空白试样溶液各**.*µ*进样，进行质谱分析。以质谱信息和保留时间定性，以试样中*-***或***或峰面积与内标物质峰面积比值定量。待测试样溶液中*-***或***或的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应?释后再进样分析。

*定性判定按照上述条件测定试样和标准工作溶液，如果试样中的质量色谱峰保留时间

与标准工作溶液*致(变化范围在±*.*%之内)样品中目标化合物的两个子离子的相对丰度与浓度相当标准溶液的相对丰度*致，相对丰度偏差不超过表*的规定，则可判断样品中存在目标化合物*-***或***。

表*定性离子相对丰度的最大允许偏差

_{**分析结果的表述}

试样中*-***(***)含量按公式(*)计算:

(*-**=^*

)´*´**^*

_{………………………………(*)}

式中:

^*´***

*——试样中*-***或***的含量，单位为克每千克(**/**)

*——由标准曲线查得试样进样液中*-***或***的浓度，单位为钠克每毫升(**/**)

^**^{——由标准曲线查得空白试样进样液中*-***或***的浓度，单位为钠克}每毫升(**/**)

*——试样制备液总体积，单位为毫升(**)

_{*——试样质量，单位为克(*)}

结果保留*位有效数字。

**   空白实验

除不称取样品外，以***µ*水做空白，从*.*以下步骤进行。

**回收率

在添加浓度****/**～*****/**浓度范围内，回收率在**%～***%之间，相对标准偏差小于**%。

**允许差

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的**%。

**   其他

本方法线性范围为*.***µ*/**～*.*µ*/**。当取样量**时，经前处理后最终定容至*.***时，检出限为***/**，定量限为****/**。

附录*

_{图*.*         ***和*-***标准溶液的**-**/**多反应监测质量色谱图}

(保留时间*.****和*.****)

第*包

*、资质要求:

具有独立承担民事责任的能力具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度具有履行合同所必需的设备和专业技术能力具有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录参加此项采购活动前*年内，在经营活动中没有重大违法记录

*、交货时间:

交货时间:签订合同后**天。包含供货、安装、调试和培训所需时间

*、交货地点:

太原

*、付款方式:

付款方式:验收合格后付款

*、售后服务:

仪器在调试通过后提供*年保修服务，在保修期内，所有服务及配件全部免费(消耗品除外)。*.仪器厂商在接到最终用户报修通知的*小时内应答，**小时内工程师上门服务*.仪器厂商应负责在现场或培训基地培训买方的技术人员、操作和?护人员。

*、其他要求:

其他需求:中标后签订合同前需提供制造厂商授权书和售后服务承诺书。中标后需提供资料:*.维修保证书。*.仪器操作手册。*.维修手册及服务卡。*.详细的操作指南。

*、技术要求: